Nöron Benzeri Hücre Hatlarında RNA Interferans Aracılı Gen İfadesi Baskılama Çalışmaları: in vitro SMA modelleri

Authors : Gamze BORA

Pages : 140-147

Doi:10.20515/otd.497543

View : 15 | Download : 8

Publication Date : 2020-03-17

Article Type : Research Paper

Abstract :Ökaryotik hücredeki biyolojik olayların açıklanabilmesi amacıyla primer hücrelere ulaşımın kısıtlı olduğu durumlarda hücre hatları kullanılmaktadır. Hücre hatları, primer hücreleri birebir yansıtmamalarına karşın hastalık modeli oluşturmak için sıklıkla ihtiyaç duyulan ve kullanılan hücrelerdir. Bu çalışmada genlerin fonksiyonunun baskılanması prensibine dayanan RNA interferans yöntemi iki farklı nöron benzeri hücre hatında uygulanmış, hücrelerin birbirlerine göre avantajları/dezavantajları, nörodejeneratif bir hastalık olan Spinal müsküler atrofi üzerinden karşılaştırılmıştır. In vitro SMA modeli oluşturmak üzere, nöron benzeri hücrelere farklılaştırılan PC12 ve NSC34 hücre hatlarında SMN gen ifadesi siRNA yöntemi ile baskılanmiş, baskılanma Western blot ve immünfloresan boyama yöntemleri ile gösterilmiştir.PC12 ve NSC34 hücre hatlarında SMN gen ifadesi %90’ın üzerinde baskılanabilmiş ve çalışmalar sırasında hücre hatlarının kültür, farklılaşma, transfeksiyon koşulları arasındaki farklar karşılaştırmalı olarak incelenmiştir. Elde ettiğimiz bulgular, ileride nöron benzeri PC12 ve NSC34 hücre hatları kullanılarak gerçekleştirilecek çalışmalar açısından yol gösterici olacaktır.
Keywords : Hücre hatları, PC12, NSC34, RNA interferans