Alkali pH’da Escherichia coli’nin VBNC Forma Geçişinde CusS-CusR İki Bileşikli Sisteminin Rolünün Araştırılması

Authors : Özge KAYGUSUZ, Cihan DARCAN

Pages : 36-50

Doi:10.53501/rteufemud.982864

View : 26 | Download : 10

Publication Date : 2021-12-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Canlı fakat kültürü yapılamayan insert ignore into journalissuearticles values(VBNC); durum henüz moleküler mekanizması çözülememiş bir süreçtir. Bu çalışmada iki bileşikli fosforlama sistemlerinden birisi olan CusS-R’nin alkalin pH insert ignore into journalissuearticles values(8.5); ortamında VBNC forma geçişte rollerinin olup olmadığı araştırılmıştır. Çalışmada elde edilen sonuçlara göre hem cusS hem de cusR genlerinin nakavt edilmesi pH 7.2 de bir etki göstermezken, E. coli‘nin alkali ortamda yaşamını sınırlamıştır. Yabani tip E. coli W3110’un plak sayımına göre t99 değeri 57 gün iken, bu değer cusS geni nakavt edildiğinde 31, cusR geni nakavt edildiğinde ise 34 gün olduğu tespit edilmiştir. Nakavt edilmiş olan genler plazmit ile tamamlandığında t99 değerinin E. coli cusS mutantı için 62 gün, E. coli cusR mutantı için 61 gün olarak tespit edilmiş olup bu değerler yabani tip E. coli ile benzerdir. Mutantlarda alkali pH’da görülen bu azalmanın VBNC oluşumundan kaynaklanıp kaynaklanmadığını belirlemek için canlı hücre sayımları Live Dead sayımı, CTC sayımı ve DVC sayım metotları ile elde edilmiştir. Bu sayım sonuçlarına göre mutantların plak sayımlarında görülen azalmanın aslında VBNC forma giren bakterilerden kaynaklandığı tespit edilmiştir. Dolayısı ile cusS ve cusR genlerinin VBNC forma geçişte bir rolleri olmadığı tespit edilmiştir.
Keywords : Escherichia coli, cusS R, Alkalin pH, VBNC, İki Bileşikli Fosforlama