Covalent Immobilization of α-Amylase from Thermophilic Geobacillus sp. TF14 on Chitosan Beads

Authors : Şaban KESKİN, Nagihan SAĞLAM ERTUNGA, Kadriye İNAN BEKTAŞ

Pages : 1342-1348

Doi:10.16984/saufenbilder.293313

View : 27 | Download : 11

Publication Date : 2017-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, daha önce Geobacillus sp. TF14den saflaştırılmış α-amilaz enzimi, kitosan boncuklara kovalent olarak immobilize edildi. Kitosan boncuklar, toz haldeki kitosanın % 5’lik asetik asit çözeltisinde çözülmesi ve 1 M NaOH çözeltisine damla damla eklenmesiyle elde edildi. Daha sonra boncuklar NaOH`in fazlasının giderilmesi için ard arda saf su ile yıkandı. İmmobilizasyon iki aşamada gerçekleştirildi. Öncelikle, % 2,5 Gluteraldehit çözeltisi ile reaksiyona sokularak kitosan boncuklar aktive edildi. Aktive edilmiş kitosan boncuklar immobilizasyonun tamamlanması için enzim çözeltisi ile karıştırıldı. İmmobilize edilen α-amilazın biyokimyasal karakterizasyonu da gerçekleştirildi. İmmobilize α-amilazın pH 9,00`da maksimum aktiviteye ulaştığı ve enzimin 48 saatlik bir sürede bu pH`da oldukça kararlı olduğu tespit edildi. İmmobilize enzimin optimum sıcaklık değeri 95 °C olarak belirlendi. Enzimin, bu sıcaklıkta 48 saat inkübasyon işleminden sonra başlangıçtaki aktivitesinin % 50`sini koruduğu tespit edildi. Mn 2+ , Co 2+ ve EDTA’nın immobilize enzim aktivitesini neredeyse tamamen inhibe ettiği, diğer metal iyonlarının farklı oranlarda inhibisyona neden olduğu belirlendi. Bazı deterjanlar varlığında enzimin aktivitesini koruduğu tespit edildi. İmmobilize edilen α-amilazın nişasta esaslı birçok sanayi alanında kullanılabileceği sonucuna varılabilir.
Keywords : α amilaz, immobilizasyon, kitosan, karakterizasyon