Optimization of Medium Components for Enhanced Expression of Recombinant Human Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF165) in Kluyveromyces lactis GG799

Authors : Hülya Kuduğ Ceylan, Cafer Meydan, Ayşe Nalbantsoy, Murat Elibol

Pages : 95-105

Doi:10.46810/tdfd.1474399

View : 131 | Download : 61

Publication Date : 2024-06-28

Article Type : Research Paper

Abstract :Vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEGF165), anjiyogenezdeki rolünden dolayı çeşitli fizyolojik süreçler ve kanser gibi patolojik hastalıklar ile ilişkili önemli bir biyobelirteçtir. Bu nedenle, yüksek verimde rekombinant VEGF165 elde etmek için etkili bir yöntem gereklidir. Bu çalışmada, Kluyveromyces lactis (K. lactis) GG799 hücrelerinde rekombinant VEGF165 ekspresyonunu artırmak amacıyla büyüme ortamının optimize edilmesi amaçlanmıştır. Farklı ortam bileşenlerinin taranması sonucunda galaktoz, tripton ve maya ekstraktı en etkili bileşenler olarak belirlenmiştir. Box-Behnken tasarımı kullanılarak seçilen ortam bileşenleri optimize edilmiş ve biyokütle konsantrasyonunda %31\'lik kayda değer bir artış sağlanmıştır. 45 g L-1 galaktoz, 30 g L-1 tripton ve 5 g L-1 maya ekstraktı içeren optimize ortam ile 0,26 gDCW L-1 h-1 biyokütle üretkenliğine (P) ulaşılmıştır. Ayrıca VEGF165 ekspresyonu, optimize edilmemiş ortama kıyasla 1,27 kat artışla 1024,09 μg L-1 değerine ulaşmıştır. Elde edilen sonuçlar, önerilen optimize edilmiş ortamın K. lactis\'te diğer rekombinant proteinlerin üretimine yönelik proses geliştirme stratejisi olarak bir model olabileceğini göstermektedir.
Keywords : Vasküler endotelyal büyüme faktörü VEGF165, Kluyveromyces lactis, Biyokütle optimizasyonu, Rekombinant protein, Yanıt Yüzey Metodu

ORIGINAL ARTICLE URL