Lazer Ablasyonu ile Sentezlenmiş Levan Kaplı Altın Nanoparçacıkların siRNA Transfeksiyon Ajanı Olma Potansiyeli Üstüne Çalışma

Authors : Ömer AKTÜRK, Beste ÇAĞDAŞ TUNALI

Pages : 282-298

Doi:10.29137/umagd.943584

View : 28 | Download : 12

Publication Date : 2022-01-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, altın nanoparçacık insert ignore into journalissuearticles values(AuNP); temelli kısa interferanslı RNA insert ignore into journalissuearticles values(siRNA); transfeksiyon vektörü tasarlanmıştır. Sıvı içinde atımlı lazer ablasyon yöntemiyle insert ignore into journalissuearticles values(PLAL); levan polisakkariti içeren ortamda sentezlenen AuNP’ler insert ignore into journalissuearticles values(Levan-AuNP);, karakterizasyon testlerinin ardından MCF-7 meme kanseri hücrelerinde siRNA transfeksiyon çalışmalarında kullanılmıştır. Hedefsiz siRNA sekansı ile gerçekleşen %48’lik Levan-AuNP-siRNA etkileşimi A260 absorbans ölçümleriyle bulunmuştur. Farklı derişimlerde Levan-AuNP ve 50 nM siGLO Green transfeksiyon indikatörü hazırlanarak MCF-7 hücrelerindeki optimum siRNA transfeksiyon koşulları belirlenmiştir. Transfeksiyon çalışmalarında öncelikle üçlü floresan boyama insert ignore into journalissuearticles values(siGLO Green, propidyum iyodür insert ignore into journalissuearticles values(PI); ve Hoechst 33342); yapılmış ve sitotoksisite görülmemiştir. Özellikle en yüksek derişimdeki Levan-AuNP grubunda ilk günde transfeksiyon gerçekleşirken, tek başına siGLO Green grubunda transfeksiyon gerçekleşmemiştir. 2 ve 4 günlük inkübasyonda ise tüm gruplarda transfeksiyon gözlemlenmiştir. PI ve Hoechst kullanılmadan yapılan ikinci transfeksiyon çalışmalarında ise siGLO Green floresan şiddetinin belirgin şekilde arttığı ve özellikle Levan-AuNP-siGLO Green komplekslerinde daha kuvvetli ve noktalı bir floresan ışıma görülmüştür. Ortalama floresan şiddetleri ölçümlerine göre, tüm Levan-AuNP gruplarında istatistiksel açıdan anlamlı ölçüde artış bulunmuştur. Sonuç olarak, bu çalışmada geliştirilen Levan-AuNP’nin, mevcut transfeksiyon ajanlarına alternatif olabileceği gösterilmiştir.
Keywords : Levan, altın nanoparçacık, lazer, siRNA, transfeksiyon