Cross-Linked Glucose Oxidase Aggregates: Synthesis and Characterization

Authors : Fatma AYHAN, Yasemin İspirli DOĞAÇ, Hakan AYHAN

Pages : 241-251

View : 18 | Download : 10

Publication Date : 2011-08-01

Article Type : Research Paper

Abstract :S unulan çalışmanın amacı Aspergillus niger Glukoz Oksidaz enziminin taşıyıcısız immobilizasyonunu çapraz bağlı enzim agregatları olarak gerçekleştirmek, en uygun immobilizasyon koşullarını bulmak ve immobilize enzim kümelerinin özelliklerini belirlemektir. Taşıyıcısız enzim immobilizasyonu çapraz bağlı glukoz oksidaz enzim agregatları ÇBEA oluşturarak uygulanmıştır. ÇBEA’nın oluşumu sırasında farklı çöktürücüler yine farklı ortamlarda kullanılmıştır. “İmmobilize enzim aktivitesi” aktivite tayin yöntemine göre glukoz substratı kullanılarak ölçülmüştür. Deneylerin sonunda çapraz bağlı enzim agregatları için bulunan ve en yüksek enzim aktivitesini veren en uygun koşullar: başlangıç enzim derişimi, 0.5 mg/ml; en uygun sıcaklık, 25oC; çöktürücü türü, Bovin Serum Albümin BSA ; çöktürücü derişimi, 5 mg/ml; ve glutaraldehit derişimi, % 2 v/v . En uygun koşulların belirlenmesinden sonra glukoz oksidaz agregatlarının performanslarını belirlemek üzere farklı derişimlere sahip glukoz çözeltileri hazırlandı 1.0 - 4.0 mg/dl . Verilerin Lineweaver-Burk doğrusu olarak çizimi ile kinetik parametreler Km= 0.0115 mM ve Vm=1.206 mM.min-1 serbest enzim için ve ÇBEA için Km= 0.025 mM; V=0.593 mM.min-1 olarak hesaplanmıştır. m
Keywords : Glukoz oksidaz, taşıyıcısız enzim immobilizasyonu, çapraz bağlı enzim agregatları, ÇBEA