Purification of Glutathione S-Transferase Enzyme from Rainbow Trout Erythrocytes and Examination of the Effects of Certain Antibiotics on Enzyme Activity

Authors : Veysel ÇOMAKLI, Mehmet ÇİFTCİ, Ömer İrfan KÜFREVİOĞLU

Pages : 413-419

View : 23 | Download : 10

Publication Date : 2011-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :B u çalışmada bazı antibiyotiklerin gökkuşağı alabalık eritrositlerinden elde edilen glutatyon-S-transferaz EC 2.5.1.18 enzim aktivitesi üzerine etkileri araştırıldı. Bu amaçla eritrosit glutatyon S- transferaz enzimi glutatyon–agaroz afinite kromatografisi tekniği ile %90 verimle 8714 kat saflaştırıldı. Saflaştırma esnasında sıcaklık kontrol altında tutuldu +4oC . Enzim saflığı SDS-PAGE yapılarak kontrol edildi. Yaklaşık olarak 23 kDa’da tek bant elde edildi. GST enzim aktivitesi, 1-kloro-2,4-dinitrobenzenglutatyon CDNB-GSH konjugatının oluşumunun spektroskopik olarak izlenmesi ile belirlendi. Kinetik çalışmaların tamamında bu metot kullanıldı. Ayrıca enzim aktivitesi üzerine gentamisin, amikasin, sefuroksim sodyum, ampisilin, ornidazol ve metranidazol gibi antibiyotiklerin inhibisyon etkileri incelenerek yüksek inhibisyon etkisi gösteren gentamisin, amikasin, sefuroksim sodyum ilaçlarının IC değerleri ve Ki sabitleri hesaplanarak inhibisyon tipleri belirlendi
Keywords : Glutatyon S transferaz EC 2 5 1 18, gökkuşağı alabalık eritrositleri, antibiyotikler