Bacillus pumilus NK14 İzolatının Proteaz Enzim Aktivitesinin Belirlenmesi ve Enzimin Leke Çıkarıcı Etkisinin Tespiti

Authors : Ebru ÖZTAŞ GÜLMÜŞ, Arzu GÖRMEZ

Pages : 7-12

View : 29 | Download : 6

Publication Date : 2018-12-05

Article Type : Research Paper

Abstract :Proteaz enzimi deri, gıda, tekstil, deterjan ve ilaç sanayisi gibi pek çok alanda yaygın olarak kullanılmaktadır. Özellikle termofilik bakterilerden elde edilen alkalin proteaz enzimleri uzun raf ömürleri, yüksek katalitik aktiviteleri ve stabiliteleri nedeniyle oldukça ilgi çekmektedir. Bu bağlamda yapılan çalışmada Erzurum sıcak su kaynaklarından bakteriyel izolasyonlar yapılarak bu izolatların proteaz enzim aktiviteleri analiz edildi. İzolatlar; Gram boyama, endospor, katalaz, oksidaz, proteaz, lipaz ve amilaz testlerine tabi tutuldu. Bu amaçla izolatlar öncelikle %10 Skim Milk içeren besiyerlerinde inkübasyona bırakılarak proteaz enzim aktiviteleri tespit edildi. Besiyerlerinde proteolitik zon oluşturan izolatlar 16S rRNA dizi analiziyle tür seviyesinde tanılandı. En yüksek proteolik zon oluşturan Bacillus pumilus NK14 izolatının kültür süpernatantından elde edilen proteaz enziminin aktivite testi yapıldı insert ignore into journalissuearticles values(91,17 EU/ml); ve birtakım parametrelerin bu enzim aktivitesi üzerine etkileri tespit edildi. B. pumilus NK14 izolatının optimum enzim aktivitesini 50°C’de pH 10’da gösterdiği, sıcaklık ve pH stabilite testleri sonucunda 40°C’de ve pH 8’de kararlı yapıda olduğu gözlendi. Enzimin PMSF ile büyük bir oranda inhibe olduğu insert ignore into journalissuearticles values(%17);, EDTA, EGTA, SDS ve üre ile de aktivitesinin azaldığı insert ignore into journalissuearticles values(%75, %80, %65, %88); belirlendi. Tween 20 insert ignore into journalissuearticles values(%108); ve Tween 80 insert ignore into journalissuearticles values(%115); ile muamele sonucunda enzim aktivitesinde artış olduğu, Ca+2, Mg+2 ve Mn+2 divalent metal iyonlarıyla enzim aktivitesinin sırasıyla %110, %112, %125 oranında arttığı, buna karşın Zn+2 ve Cu+2 ile de %86 ile %78 oranında azaldığı tespit edildi. İzolata ait Lineweaver-Burk grafiği çizilerek Km ve Vmax değerleri hesaplandı insert ignore into journalissuearticles values(0,673 mg/ml-99 EU/ml);. B. pumilus NK14 izolatının kültür süpernatantından elde edilen proteaz enziminin deterjan sanayi uygulamalarında kullanılabilirliğini test etmek amacıyla kan lekesi bulaştırılmış kumaş parçaları üzerinde leke çıkarıcı etkisi test edilerek sonuçların oldukça etkili olduğu tespit edildi.
Keywords : termofil, proteaz, Bacillus pumilus, 16S rRNA, deterjan sanayi