Effects of cholinergic compounds and TNF-alpha on human erythroleukemia K562 cell proliferation and caspase expression

Authors : Zehra KANLI, Banu AYDIN, Hulya CABADAK

Pages : 20-26

Doi:10.5472/marumj.518797

View : 9 | Download : 4

Publication Date : 2019-01-29

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: Bu çalışmanın amacı, otoparakrin M3 muskarinik reseptör sinyal yolağının uyarılmasının, insan eritrolösemi K562 hücrelerinin çoğalmasında ve kaspaz 3, 8 ve 9 ekspresyon seviyeleri üzerinde etkisi olup olmadığını araştırmaktır. Hücre sinyal ileti mekanizmasında muskarinik reseptörlerin rolünü daha iyi anlamak üzere, çeşitli bileşiklerin insan eritrolösemisi K562 hücre proliferasyonu ve kaspaz 3, 8 ve 9 ekspresyon seviyeleri üzerindeki etkilerini araştırdık. Bu bileşikler, M 3 muskarinik reseptör agonisti, pilokarpin, pro-enflamatuvar sitokin, tümör nekroz faktör insert ignore into journalissuearticles values(TNF);- alfa ve fosfoinositid 3-kinaz inhibitörü wortmanindir. Gereçler ve Yöntemler: Hücre çoğalması ve hücre canlılığı, tripan mavisi testi ve 5-Bromo-2-deoxy-uridine insert ignore into journalissuearticles values(BrdU); İşaretleme ve Belirleme kitleri ile değerlendirildi. Kaspaz 3, 8 ve 9 ekspresyon seviyeleri immunoblot analizi ile belirlendi. Bulgular: Hem pilokarpin, hem de TNF-alfa, insan eritrolösemi K562 hücre çoğalmasında çok az artışa neden oldu. Ancak, tüm bileşikler birlikte muamele edildiğinde, insan eritrolösemi K562 hücrelerinin çoğalması, muamele edilmeyen kontrol hücrelerine göre anlamlı olarak arttı. TNF-alfa ve wortmanin ile muamele edilen K562 hücrelerinde kaspaz 3 ve kaspaz 8 ekspresyonu seviyelerinde anlamlı değişim belirlendi. TNF-alfa ve wortmannin muamelesi kaspaz 9 ekspresyon seviyesini arttırdı insert ignore into journalissuearticles values(P> 0.05); ancak anlamlı değildi. Sonuç: Bu bulgular, kısmen M3 muskarinik reseptör aracılı K562 hücre çoğalmasında artış olduğunu göstermektedir. Pilokarpin, insan eritrolösemi K562 hücrelerinde, TNF-alfa ve wortmanin ile uyarılan kaspaz 3 ve 8 ekspresyonunu önledi ve dolaylı olarak apoptozu gösterdi.
Keywords : M3 muskarinik reseptorler, Sitokin, Pilokarpin, Kaspaz, Eritrolösemi K562 hücreleri