İyonize Radyasyondan Kaynaklanan Nekroz ve Otofaji Üzerine Vitamin C’nin Etkisinin İn Vitro Olarak Değerlendirilmesi

Authors : Semiha DEDE, Veysel YÜKSEK, Osman YILMAZ, Sedat ÇETİN, Ayşe USTA, Mehtap GÜNEY

Pages : 169-172

View : 22 | Download : 12

Publication Date : 2019-12-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışma, iyonize radyasyondan kaynaklanan nekrotik ve otofajik yolaklarda Vitamin C’nin olası koruyucu etkisininin vitro olarak araştırılması amacıyla planlandı. Bu amaçla NRK-52E böbrek epitelyal hücre hattı kullanıldı. Hücreler(%10 FBS, %1 L-Glutamin (2mM) ve %1 Penisilin/Streptomisin içeren RPMI 1640) besi ortamında çoğaltıldı. Dahaönce yapılan çalışmalarda belirlenen Vitamin C’nin proliferasyon artırıcı konsantrasyonu (100 μM) uygulandı. Kontrol,İyonize Radyasyon, Vitamin C, İyonize Radyasyon+Vitamin C, Vitamin C+İyonize Radyasyon olmak üzere 5 çalışmagrubu oluşturuldu. İyonize Radyasyon gruplarına 8 Gy iyonize radyasyon uygulandı. Bütün gruplar 24 saat inkübeedildikten sonra total RNA ve cDNA izolasyonu yapılarak, qRT-PCR ile kontrol genine göre; nekrotik (RIPK 1, RIPK3) veotofajik (ATG3, ATG5, BECN1, Map3A) hedef genlerinin ekspresyon seviyeleri belirlendi. Radyasyon grubunda nekrotikve otofajik genlerin kontrol grubuna göre anlamlı olarak arttığı bulundu. Radyasyona maruz kaldıktan sonra verilenvitamin C’nin, Map3A hariç tüm genlerin ekspresyonunu azalttığı saptandı. Sonuç olarak, iyonize radyasyonun NRK-52Ehücre hattındaki nekrotik ve otofajik hücre yollarını etkilediği, sitotoksik mekanizmayı aktive ettiği ve Vitamin C’niniyonize radyasyon uygulamasından önce ve sonra Map3A hariç, nekrotik ve otofajik genlerin down-regülasyonuna yolaçtığı belirlendi. Vitamin C’nin iyonlaştırıcı radyasyona bağlı sitotoksisite üzerindeki etkilerinin araştırılmaya değerolduğu düşünülmektedir.
Keywords : Hücre kültürü, İyonize radyasyon, Nekroz, Otofaji, Vitamin C