Nörogenez Belirteci Olan Doublecortin Proteininin Elektron Mikroskopik Düzeyde Gösterilmesi

Authors : Ozlem Tugce Cilingir Kaya, Cynthia Moore, Charles Meshul, Serap Şirvancı

Pages : 6-10

View : 19 | Download : 12

Publication Date : 2017-03-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç : Yetişkin beyninde yeni oluşan nöronların gösterilmesi nörogenez sürecinin aydınlatılması açısından önem taşımaktadır. Çalışmamızda hipokampusun dentat girus insert ignore into journalissuearticles values(DG); bölgesinde, yeni oluşan nöron belirteci olan doublecortin insert ignore into journalissuearticles values(DCX); proteini için uygun gömme öncesi mikrodalga işaretleme metodu oluşturmayı amaçladık.   Yöntemler : 10 haftalık C57BJ/6J erkek farelerden perfüzyon fiksasyonu ile beyin dokuları elde edildi. Vibratom ile beyin dokularından alınan kesitler, gömme öncesi mikrodalga yöntemi ile anti-DCX antikoru ile işaretlendi. 3,3`-diaminobenzidin insert ignore into journalissuearticles values(DAB); ile boyanan dokular, mikrodalga yardımı ile elektron mikroskopik analizler için hazırlandı. Epon bloklar üzerindeki dokulardan ince kesitler alınarak elektron mikroskobunda incelendi ve morfolojik analiz için fotoğraflandı.   Bulgular : Mikrodalga yöntemi kullanılarak yapılan gömme öncesi DCX işaretlemesi hem ışık hem de elektron mikroskopik insert ignore into journalissuearticles values(EM); düzeyde spesifik olarak gösterildi. DCX pozitif hücrelerin subgranüler zon insert ignore into journalissuearticles values(SGZ); ve granüler tabakada yerleşim gösterdikleri izlendi. Elektron mikroskopik incelemelerde DCX immünreaktivitesinin akson, dendrit ve hücre gövdeleri üzerinde pozitif olduğu gözlendi.   Sonuç : Çalışmamızda, mikrodalga kullanılarak yapılan gömme öncesi immün-elektron yöntemi ile DG bölgesinde DCX varlığının belirlenebildiğini gösterdik. Çalışmamız DCX immünreaktif hücreleri, gömme öncesi DAB işaretlemesi ile elektron mikroskopik düzeyde göstererek, nörogenez sürecinin araştırılacağı ileri çalışmalar için temel oluşturmaktadır.
Keywords : Nörogenez, doublecortin, gömme öncesi mikrodalga tekniği, immün elektron mikroskopi