Evaluation of ezrin and fascin 1 in the PFOS treated Sertoli cell culture: An in vitro study

Authors : Nazlı Ece GUNGORORDUERİ

Pages : 16-20

Doi:10.30565/medalanya.573983

View : 12 | Download : 8

Publication Date : 2020-03-02

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: Bu çalışmada, Ezrin ve Fascin 1’in in vivo olarak baskılanması sonucundaki bulgularla birlikte, Kan testis bariyeri insert ignore into journalissuearticles values(KTB); yapısının bozulması ve primer Sertoli hücre kültüründe, Perflorooktansülfonat insert ignore into journalissuearticles values(PFOS); muamelesinden sonra F-aktin demetlenmesinin gösterilmesi amaçlanmaktadır. Yöntem: Çalışma Tasarımı: Primer Sertoli hücre izolasyonu, kontrol ve PFOS ile muamele edilen insert ignore into journalissuearticles values(20μM); gruplarla yapıldı. Sertoli hücre konsantrasyonu her iki deney için 0.5 x 106 hücre/ml olacak şekilde hazırlandı. Metod: Hem Fascin 1`in Sertoli hücrelerinde Ezrin ile birlikte lokalizasyonunu değerlendirmek üzere çift etiketli immünofloresan analizi yapıldı, hem de seminifer tübül lizatlarından aktin ve Ezrin proteinlerinin Fascin 1 proteini ile spesifik protein-protein etkileşimini tanımlamak için Co-IP deneyi uygulandı. Bulgular: İlk olarak, ektoplazma özelleşmesi bileşenleri olan Ezrin ve Fascin 1 in Sertoli hücrelerinde ko-lokalize olduğu ve birbirleri ile etkileşime girdiği gösterilmiştir. İkinci olarak ise PFOS ile muamele edilen Sertoli hücrelerinde Ezrin ve Fascin 1 dislokasyonu gösterilmiştir. 20μM PFOS uygulandığında aktin tabanlı hücre iskeleti KTB’deki hüce-hücre bağlantı bölgelerindeki aktin düzenleyici proteinlerin yayılmasını ve/veya lokalizasyonunu destekleyememiştir. Tartışma: Sonuç olarak bu bulgular, PFOS aracılı Sertoli hücre bozulmasında, Ezrin ve Fascin 1`in KTB bütünlüğünü korumak için F-aktin organizasyonunu düzenleyerek birlikte çalışabileceğini desteklemektedir.
Keywords : Kan testis bariyeri, ektoplazma özelleşmesi, F aktin, Ezrin, Fascin 1, PFOS