Rapid and Specific Purification of RNA by PolyUracil Membranes

Authors : Canan ARMUTCU

Pages : 466-482

Doi:10.37094/adyujsci.780049

View : 18 | Download : 13

Publication Date : 2020-12-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Ribonükleik asit (RNA), hücresel savunma, deoksiribonükleik asit (DNA) replikasyonu, transkripsiyon, canlı organizmalar için gen ekspresyonununda önemli bir rol oynar, bunun yanı sıra kanser, immün yetmezlik, tümör gibi birçok hastalık RNA'nın bozulmasıyla ilişkililendirilmiştir. Bu amaçla, RNA saflaştırmak için nükleotid bazlı ligand kullanılarak gözenekli membranlar tasarlanmıştır. Bu çalışmada, polimerize edilebilir urasil monomeri urasil metakrilat (UraM) olarak sentezlenmiş, 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) bazlı membranlar [poli(HEMA-UraM)] UraM ve HEMA monomerlerinin kopolimerizasyonu ile kısmen dondurulmuş koşullar altında yığın polimerizasyonu ile hazırlanmıştır. Bu membranlar şişme çalışması, Fourier dönüşümlü kızılötesi spektroskopisi (FTIR) ve taramalı elektron mikroskobu (SEM) ile karakterize edilmiştir. Ayırma koşullarını optimize etmek için, pH, başlangıç RNA konsantrasyonu, süre ve sıcaklığın RNA adsorpsiyon kapasitesi üzerindeki etkileri incelenmiştir. Poli(HEMA-UraM) membranın maksimum RNA adsorpsiyonu 25.0 °C, pH 7.0, 0.5 mg/mL RNA başlangıç derişiminde 15.52 mg/g olduğu bulunmuştur. On tekrarlı adsorpsiyon-desorpsiyon döngüsünden sonra, RNA adsorpsiyon kapasitesi yalnızca %3.68 oranında azaldığı gözlenmiştir.Membran;
Keywords : Membran, Urasil metakrilat, Nükleotid, Ribonükleik asit, Saflaştırma