Cloning, Overexpression and Characterization of the FeSI Protein from Azotobacter vinelandii CA6

Authors : Burak KABASAKAL

Pages : 470-476

Doi:10.35414/akufemubid.1124731

View : 28 | Download : 15

Publication Date : 2022-06-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, Azotobacter vinelandii CA6'dan Shethna protein I veya FeSI proteini olarak da bilinen [2Fe-2S] proteini izole edilmiş, E. coli'de aşırı ifade edilmiş ve saflaştırılmıştır. SDS-PAGE analizi, saflaştırmanın her aşamasında proteinin monomer boyutu olan ~11 kDa'da bir bant göstermiştir. FeSI jel filtrasyon profili, doğal halde dimer olduğunu işaret etmektedir. UV-görünür spektrumunda, demir-kükürt kümesine özgü 344, 418 ve 464 nm dalga boylarında absorbanslar ölçülmüştür. A. vinelandii CA6 FeSI proteininin dizisi, korunmuş sistein rezidüleri dahil olmak üzere, nitrojen sabitleyici Clostridium pasteurianum ve bir nitrojen sabitleyici olmayan Aquifex aeolicus'tan elde edilen [2Fe-2S] ferredoksinlerin dizilerine benzemektedir. Bu bulgular, FeSI geninin Azotobacter vinelandii CA6'daki majör nif gen kümesinde bulunmasına rağmen hiçbir kanıt olmadığı için FeSI'in nitrojen fiksasyonuna dahil olabileceğini veya olmayabileceğini düşündürmektedir. Bu çalışma, FeSI'in nitrojen fiksasyonundaki işlevini ve diğer [2Fe-2S] proteinleri ile olan ilişkilerini anlamak için faydalı olacaktır.
Keywords : Demir kükürt proteini, Azot fiksasyonu, Nitrojenaz, Azotobacter vinelandii CA6