Bovine Ephemeral Fever Virüsün Rekombinant Glikoprotein ve Nükleoproteinlerinin Üretilmesi*

Authors : Hasan ABAYLI, Şükrü TONBAK, Ahmet Kürsat AZKUR, Hakan BULUT

Pages : 149-156

View : 18 | Download : 13

Publication Date : 2017-12-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, bovine ephemeral fever virüsün (Üç gün hastalığı virüsü; BEFV) glikoprotein (G) ve nükleoprotein-lerinin (N) rekombinant DNA tekniği ile üretilmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla, Türkiye izolatlarından çoğaltılan BEFV G ve N genlerini taşıyan pcDNA4/HisMax-TOPO ökaryotik ekspresyon vektörleri oluşturulmuş ve elde edilen rekombinant vektörlerle transfekte edilen hücrelerde bu proteinlerin in vitro üretilmesi gerçekleştirilmiştir. Geçici ve stabil transfekte hücrelerde RT-PCR ile mRNA düzeyinde genlerin transkripsiyonu doğrulanmıştır. Ayrıca, transfekte hücrelerden pürifi-ye edilen rekombinant proteinler Western blotlama deneyi ile gösterilmiştir. Bu çalışma sonucunda, BEFV teşhis ve korunmasında iki önemli proteinin üretimi ve pürifikasyonu gerçekleştirilmiştir. Elde edilen bu proteinlerin teşhis kitleri-nin hazırlanması ve sub-ünit aşı olarak kullanım potansiyeli bulunmaktadır.
Keywords : BEFV glikoprotein, BEFV nükleoprotein, bovine ephemeral fever, rekombinant DNA teknolojisi