Hücre Kültürlerindeki Mycoplsma Kontaminasyonlarının Fluorescense (DAPI) ve Aceto-Orcein Boyama Yöntemleri ile Tespiti Çalışmaları

Authors : S İsmet GÜRHAN, Aysun ÖZTÜRKMEN

Pages : 105-116

View : 29 | Download : 12

Publication Date : 1990-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Hücre kültürlerinin mikoplazma kontaminasyonlarının tespiti için kullanılan aceto-orcein ve floresan DAPI ile boyama yönteminin bazı özellikleri karşılaştırmalı olarak incelendi: 1- Laboratuvarımız stoklarında mevcut hücre kültürleri bu iki metot ile test edildi; 2- Birinci aşamada mikoplazma suşu ile kontamine edildi ve gene sözkonusu iki metot ile test edildiler; 3-Mikoplazmadan ari Vero, FL ve BHK21 An30 hücre kültürleri, kontamine olduğu birinci aşamada tespit edilmiş olan BHK21 An14 hücre kültürünün vasatı ile ayrı ayrı 1/10 ve 1/100 dilusyonlarda enfekte edildi ve iki metotla test edildiler. Sonuçta floresan DAPI boyama yönteminin aceto-orcein boyama yöntemine nisbetle daha duyarlı olduğu tespit edildi. Ancak, literatürde bildirilen bazı hatalı pozitif ve negatif reaksiyonların varlığı gözönüne alınarak, daha başarılı sonuç almak için iki yöntemin beraberce kullanılması tavsiye edildi.
Keywords : Hücre Kültürü, Hücre Kültüründe Mycoplsma Kontaminasyonu, Mycoplsma Kontaminasyonu, Floresan DAPI Boyama Yöntemi, Aceto Orcein Boyama Yöntemi, Mikoplazma Kontaminasyonları, Fluorescense DAPI Boyama Yöntemi, 1990, S İsmet GÜRHAN, Aysun ÖZTÜRKMEN, Etlik Veteriner