Production of polyclonal antibodies against Turkey FMDV strains

Authors : Beyhan SAREYYÜPOĞLU

Pages : 14-19

Doi:10.35864/evmd.843095

View : 12 | Download : 18

Publication Date : 2021-06-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Antikorlar tanı laboratuvarlarında daima önemli bir yer tutmaktadır. Enzim işaretli bağışıklık testleri (ELISA), immunofloresan, antikor-mikroarray platformları, immunoblotlar, X-ışını kristalografisi gibi birçok tanı tekniği kullanımı antikorların varlığını gerektirir. Şap hastalığı serolojisinde antikorların kullanıldığı temel test ELISA’dır. ELISA testleri Şap virusu antijenini veya şap virusuna karşı organizmada oluşan antikorları tespit etmek için poliklonal veya monoklonal antikorlara ihtiyaç duyar. Bu amaçla, solid faz kompetetif ELISA (SPCE) ve likit faz bloking ELISA (LPBE) ve NSP ELISAlar kullanılır. Şap virusunun yapısal proteinlerine (SP) karşı oluşan antikorları tespit etmek için ise SPCE ve LPBE testleri kullanılır. Bu çalışma, ANep84 (genotip VII), O TUR07 (O Pan Asia II), ATUR11 (A Iran05) şap virusu suşlarına karşı (LPBE) testinde kullanılmak üzere poliklonal antikor üretmek amaçlandı. Bu amaçla, her bir FMDV serotipi için 4 kobay ve 6 tavşan kullanıldı. Antikorlar üretildikten sonra, dama tahtası (checkerboard ELISA titration) testi ile üretimi yapılan poliklonal antikorlar için optimal dilusyonlar belirlendi. Şap virusu suşlarına karşı oluşabilecek çapraz reaksiyonlar ve background reaksiyonları kontrol edildi. Sonuç olarak, bu çalışmada şap virusu ANep84 (genotip VII) ve O Tur07 (O Pan Asia II), ATUR11 (AIran05) suşlarına karşı poliklonal antikorlar üretildi ve LPBE testi için standardizasyonları yapıldı.
Keywords : şap hastalığı, üretim, poliklonal antikorlar, ELISA