Kolşisinin Zorlanmış Koşullar Altında Bozunurluk Ürünlerinin Belirlenmesi İçin LC-MS/MS Metodunun Geliştirilmesi ve Validasyonu

Authors : Süleyman GÖKCE, İbrahim BULDUK, Hüseyin ENGİNAR

Pages : 22-32

View : 15 | Download : 13

Publication Date : 2017-04-30

Article Type : Research Paper

Abstract :Kolşisin antik Yunan döneminden beri bilinen antifibrotik, anti-inflamatuar, antihistaminik, membran stabilizasyonu ve lipid peroksidasyon inhibisyonu etkileri olan bitkisel kökenli bir ilaçtır. Tüm bu özellikler inflamatuar olayların ve hücre bölünmesinin ön planda olduğu hastalıklarda bu ilacın etkili olabileceği düşüncesini gündeme getirmektedir. Yıllardır gut artritinde kullanılan kolşisin, son 50 yıldır FMF, Behçet hastalığ , skleroderma, amiloidoz ve karaciğer sirozu için de başvurulan ilaç olmuştur (Dönmez M.). Ticari farmasötik formlar içinde bulunan ilaç moleküllerinin ve saflıklarının saptanması, toksikolojik ve farmakolojik bakımdan önemlidir. Farmasötik şekillerin hazırlanması sırasında saflık ve ilgili bozulma ürünlerinin izlenebilmesi için ileri metotlara ihtiyaç vardır (U.S. Food and Drug Administration 2003, 2006). Bu çalışmanın amacı farmasötik dozaj formlarında kolşisin ve bozunurluk ürünlerinin LC-MS/MS tekniği ile hızlı bir metot geliştirmektir. Ticari dozaj formlarındaki kolşisin ve bu preparatlarda zorlanmış koşullardaki bozunurluk ürünlerinin saptanması için bir LC-MS/MS metodu geliştirilmiştir (Liu et al. 2007). UPLC tekniği ile MS/MS analizleri için optimum koşullar belirlenmiş ve sistemin validasyonu yapılmıştır. Analizlerde ACE 5 C18 250*4,6 mm kolonu kullanılmıştır. Ayırma 60:40 (v/v) metanol-su ve %0,1 formik asit ortamında gerçekleştirilmiştir. ICH Klavuzuna uygun olarak Kolşisinin parçalanma ürünleri; asidik, bazik, oksidatif, termal, UV ışık, koşulları altındaki davranışı LC-MS/MS tekniği ile incelenerek belirlenmiştir (ICH guidelines 2003). Bu koşullar; 1 M HCI 100 0 C -30 dk, 1M NaOH 100 0 C -30 dk, %3-%30 H 2 O 2 100 0 C -30 dk, 6-24 saat 100 0 C termal bozunma, 6-24 saat 254 nm dalga boyunda-oda sıcaklığında UV ışık altında bozunma şartlarında; LC-MS/MS, EJS-ESI tekniği ve pozitif iyon modda bozunurluk ürünleri gözlemlenmiştir.
Keywords : Kolşisin, UPLC, Validasyon, Bozunurluk, LC MS MS