Glutathione S-Transferase-π Levels of In Vitro Generated Epithelial Mesenchymal Transition Model in Caco-2 Cell Line

Authors : Seyhan TÜRK, İpek BAYSAL, Gülberk UÇAR

Pages : 10-16

View : 21 | Download : 21

Publication Date : 2019-01-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Modern tıptaki gelişmelere rağmen, adjuvant/neoadjuvan tedavilere direnç geli- şimi tedaviyi karmaşıklaştırabilecek en önemli sorunlardan biridir. Son yıllarda, kanser hücrelerinin epitelyal mezenkimal geçiş (EMT) aktivasyonunun, metastaz eğilimi ve kemoterapiye direncinde önemli bir rol oynadığını göstermiştir. Bu ça- lışmada CaCo-2 hücre hattında in vitro EMT modeli oluşturularak direnç meka- nizmalarının belirlenmesi hedeflenmiştir. Bu hücreler dönüşüm yetenekleri açı- sından iyi bilinen hücre hatlarıdır ve farklılaşma potansiyelleri nedeniyle yapısal ve fonksiyonel çalışmalar için önemli araçlardır. Farklılaşma 0., 15. ve 30. gün- lerde takip edilmiştir ve model validasyonu için epitelyal ve mezenkimal belir- teçler (E-kadherin ve Vimentin) kullanılmıştır. EMT’nin iki formunda da direnç mekanizmalarını aydınlatmak üzere ELISA ile Glutatyon- S-Transferaz-π (GST-π) düzeyleri analiz edilmiştir. Mezen- kimal formda beklendiği şekilde GST-π düzeyinin önemli derecede arttığı gösterilmiştir. Ayrıca mezenkimal formda direnci ortadan kaldırmaya yönelik GST-π inhibitörü hi- perisin kullanılmıştır. Hiperisinin farklı konsantrasyonları (2μM ve 20μM) ile muamele sonucu GST-π düzeylerin- de anlamlı derecede azalma tespit edilmiştir. Bu sonuçlar, adjuvan terapiye ek olarak direncin ortadan kaldırılmasını sağlayacak mekanizmaların aktifleştirilmesi ile kullanılan tedavinin etkinliğinin arttırabileceğini ortaya koymuştur.
Keywords : Kolorektal kanser, Epitelyal Mezenkimal Geçiş, Glutatyon S Transferaz π