Cellular Imaging Analysis of MTT Assay Based on Tetrazolium Reduction

Authors : Mustafa Ünal BOYRAZ, Bestoon SHEKHANY, Faruk SÜZERGÖZ

Pages : 95-99

Doi:10.35440/hutfd.816390

View : 24 | Download : 11

Publication Date : 2021-04-28

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: MTT testi, 3- (4,5-dimetiltiyazol-2-il) -2,5-difeniltetrazolyum bromürün, mitokondriyal aktivitelerle çözünmeyen formazan kristallerine indirgenmesi yoluyla canlı hücrelerin hücre metabolik aktivitesini değerlendirmek amacıyla kolorimetrik bir testtir. Tetrazolyum boya indirgenmesinin, hücre sitozolünde NADP H'ye bağımlı oksidoredüktaz enzimleri tarafından meydana getirildiği düşünülmektedir. MTT testi genellikle bitkisel ve kimyasal kökenli bileşiklerin ve toksik materyallerin sitotoksisitesini veya sitostatik aktivitesini ölçmek için kullanılmaktadır. Materiyal ve Metod: Çalışmada, tetrazolyum tuzlarının hücrelerde MTT formazan kristallerine indirgenmesini gözlemlemek amacıyla K562 hücreleri kullanıldı. K562 hücreleri, steril şartlarda kültür plağına ekildi. Kültür plağına 10 µL 5 mg / mL MTT solüsyonu ekledikten sonra hücreler %5 CO2’ li nemli ortamda 37° C' de 4 saat inkübe edildi. Kültür işlemi sırasında hücreler, 15 dakika aralıklarla 4 saat süreyle görüntülendi. Bulgular: Canlı ve cansız hücrelerin MTT' ye karşı davranışları ve canlı hücreler tarafından MTT' nin MTT formazan kristallerine dönüştürülmesi süreci net bir şekilde görüntülendi. Sonuç: Çalışmamızla, MTT testinin sitotoksisite araştırmaları için ideal bir test yöntemi olduğunu söyleyebiliriz.
Keywords : MTT testi, Tetrazolyum tuzları, Formazan kristalleri, İndirgeme