Hindi Karaciğerinden NADPH-Sitokrom P450 Redüktaz’ın Saflaştırılması, Karakterizasyonu ve Bazı Metal İyonlarının Enzim Aktivitesi Üzerindeki Etkileri

Authors : Ebru AKKEMİK, Mehmet ÇİFTÇİ

Pages : 183-189

Doi:10.21597/jist.458623

View : 42 | Download : 11

Publication Date : 2018-09-30

Article Type : Research Paper

Abstract :NADPH-Sitokrom P450 redüktaz (CPR) enzimi, detoksifikasyon metabolizmasında elektron transferini katalizleyen anahtar bir enzimdir. Bu çalışmada, hindi karaciğer mikrozomlarından CPR enziminin saflaştırılması için iki yöntem kullanılmıştır. Birinci yöntemde, CPR enzimi ~114 saflaştırma katsayısıyla ve ~%23 verimle 2’, 5’-ADP Sefaroz 4B afinite kolonu kullanılarak saflaştırılmıştır. İkinci yöntemde, CPR, DE-52 selüloz anyon değişim kolonu ve 2’, 5’-ADP Sefaroz 4B afinite kolonu kullanılarak, ~124’lük saflaştırma katsayısı ve %8 verimle saflaştırılmıştır. Enzim saflığı her iki yöntemde de SDS-PAGE ile kontrol edilmiştir. Saflaştırılmış enzimin karakteristik kinetik özellikleri belirlenmiştir. Bazı metal iyonlarının saflaştırılmış CPR enzim aktivitesi üzerindeki etkileri in vitro şartlarda araştırılmıştır. Ag+, Hg2+ ve Cu2+ metal iyonlarının CPR enzim aktivitesi üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edilmiştir.
Keywords : Hindi karaciğeri, inhibisyon, karakterizasyon, metal iyonları, sitokrom P450 redüktaz

ORIGINAL ARTICLE URL