His-etiketli pro-Mikrobiyal Transglutaminaz Enziminin Pichia pastoris’te Üretim Şartlarının Optimizasyonu

Authors : Aysun TÜRKANOĞLU ÖZÇELİK

Pages : 666-673

Doi:10.21597/jist.468323

View : 36 | Download : 15

Publication Date : 2019-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Transglutaminazlar doğada birçok organizmada bulunan ve çeşitli biyolojik işlemlerde rol alan enzimlerdir. Glutamin ve lizin aminoasitleri arasında kovalent bağ oluşumunu katalizleyerek çapraz bağ oluştururlar. Bu özelliklerinden dolayı gıda ürünlerinin fiziksel ve kimyasal özelliklerini geliştirmek amacıyla kullanılırlar. Bu çalışmada, gıda endüstrisinde kullanılan mikrobiyal transglutaminaz (MTGaz) enziminin, Pichia pastoris (P. pastoris) mayasında yapısal GAP promotoru altında üretim şartlarının optimizasyonu yapılmıştır. Bu amaçla, üç farklı sıcaklık (20°C, 25°C, 28°C) ve üç farklı pH’dan (pH 3, 5.75, 7.44) oluşan dokuz farklı koşul altında pro-MTGaz enziminin üretimi çalkalamalı erlenmayerlerde yapılmıştır. 40 saatlik protein üretimi sonrasında elde edilen sonuçlar, pro-MTGaz üretimi için 25°C sıcaklık ve 7.44 pH’nın optimum koşullar olduğunu göstermiştir.
Keywords : mikrobiyal transglutaminaz, rekombinant protein üretimi, Pichia pastoris

ORIGINAL ARTICLE URL