Molecular Characterization of the Coat Protein Genome of Alfalfa Mosaic Virus (AMV) Isolates from Alfalfa in Van Province

Authors : Mustafa USTA, Abdullah GÜLLER

Pages : 2366-2377

Doi:10.21597/jist.719099

View : 45 | Download : 14

Publication Date : 2020-12-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Van ilinde yetiştiriciliği yapılan yonca (Medicago sativa L.) bitkilerinde 2019 yılında virüslerin oluşturduğu simptomlara benzer belirtiler görülmüştür. Gözlenen belirtiler arasında cüceleşme, yapraklarda mozaik deseni ve sararma, rozetlenme ve küçük yaprak oluşumu yer almaktadır. Simptom gösteren ve göstermeyen bitkilerden toplanan 19 yonca yaprak örneğine, virüs genomunu tespit edebilmek için uygun primer çiftleri ile RT-PCR testi uygulanmıştır. Yonca yaprağı örneklerinden şiddetli belirtiye sahip altısı beklenen büyüklükte 700 bp DNA band oluşturmuştur. Bunlar arasından rastgele seçilen ikisi bir plazmid vektörüne klonlanmıştır. Elde edilen rekombinant plazmidler her iki yönde dizilenmiştir. Dizi analizi sonuçlarına göre infekteli yoncalardaki virüsün Yonca mozaik virüs olduğu açığa çıkarılmıştır. Dizi bilgileri MT210179 ve MT210178 erişim numaraları ile gen bankasına yüklenmiştir ve sırasıyla Alakoy Y9 ve Alakoy Y1 olarak isimlendirilmiştir. Her iki dizi için gen bankasına kayıtlı 16 AMV dizisi ile oluşturulan filogenetik ağaca göre, her iki izolat da nükleotit düzeyinde ABD, Brezilya ve Puglia izolatları ile en yüksek benzerlik ve Güney Kore izolatı ile en düşük benzerlik oranı göstermiştir. Ayrıca her iki dizinin birbirleri arasında, 7 nükleotit değişikliği ile %98.45 oranında nükleotit benzerliği gösterdiği ortaya çıkarılmıştır. Gerçekleştirilen litaratür tarama çalışmalarına göre, bu çalışma Türkiye'nin Van ilinde yetiştirilen yonca bitkilerindeki Yonca mozaik virüsü (AMV)’ nün ilk raporu ve moleküler analizidir.
Keywords : Dizileme, filogenetik analiz, RT PCR, karakterizasyon, yonca

ORIGINAL ARTICLE URL