Kanser Biyobelirteci Alfa-Fetoproteinin Elektrokimyasal Tayini İçin Tek Kullanımlık Etiketsiz Yeni AFP İmmünosensörünün Geliştirilmesi

Authors : Kadir ERDEM, Melike BİLGİ KAMAÇ

Pages : 1279-1292

Doi:10.21597/jist.795639

View : 94 | Download : 9

Publication Date : 2021-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu araştırmada, bir kanser biyobelirteci olan alfa-fetoproteinin (AFP) elektrokimyasal tayini için tek kullanımlık yeni etiketsiz immünosensör geliştirilmiş ve insan kan serumu numunelerinde uygulaması gerçekleştirilmiştir. Çalışmada yüzey baskılı karbon elektrotlar (SPCE) ilk olarak indirgenmiş grafen oksit (RGO) ile modifiye edilmiş ardından elektropolimerizasyon tekniği uygulanarak elektrot yüzeyi polinötral kırmızı (PNR) ile kaplanmış, son olarak elektrodepozisyon metodu ile altın nanoparçacıklar (AuNP) yüzeyde oluşturulmuştur. SPCE/RGO/PNR/AuNP elektrodunun elektrokimyasal karakterizasyonu dönüşümlü voltametri (CV), diferansiyel puls voltametri (DPV) ve kare dalga voltametri (SWV) metotları kullanılarak yapılmıştır. SPCE/RGO/PNR/AuNP elektrotların yüzeyine Anti-AFP’nin immobilizasyonu 3-merkaptopropiyonik asit (3-MPA) ve 1-etil-3-(3-dimetilamino-propil) karbodiimid/N-hidroksisüksinimid (EDC/NHS) kullanılarak kovalent bağlama yöntemi ile gerçekleştirilmiştir. Hazırlanan AFP immünosensörünün optimum çalışma parametreleri DPV ve SWV metotları ile belirlenmiştir. DPV ve SWV metotları ile belirlenen doğrusal tayin aralıkları 1-500 ng mL-1, tespit limitleri ise sırasıyla 0.79 ng mL-1 ve 0.86 ng mL-1 olarak belirlenmiştir. AFP immünosensörünün tekrarlanabilirliği 50 ng mL-1 AFP konsantrasyonu için test edilmiş ve bağıl standart sapma (R.S.D.) değerleri DPV ve SWV metotları için sırasıyla %4.06 (n=10) ve %3.68 (n=10) olarak hesaplanmıştır. Geliştirilen AFP immünosensörünün uygulama kararlılığı 60 gün boyunca, depolama kararlılığı ise 12 hafta depolama süresince voltametrik metotlarla incelenmiştir. Hazırlanan AFP immünosensörleri insan serumu örneklerine bilinen miktarda ilave edilen farklı konsantrasyonlardaki AFP’nin analizi için kullanılmış ve %95’in üstünde geri kazanımlar elde edilmiştir.
Keywords : Elektrokimyasal AFP immünosensörü, kanser biyobelirteci, indirgenmiş grafen oksit, polinötral kırmızı, altın nanopartikül, yüzey baskılı karbon elektrotlar

ORIGINAL ARTICLE URL