Wharton Jel Kaynaklı Eksozom İzolasyonu: Metot Karşılaştırma Çalışması

Authors : Dilek KAAN
Pages : 152-161
Doi:10.21597/jist.1200996
View : 51 | Download : 9
Publication Date : 2023-03-01
Article Type : Research Paper
Abstract :Eksozomlar endozomdan köken almış, immün modülasyonda önemli role sahip, hücrelerarası etkileşimi sağlayan, nano boyutta biyomoleküllerdir. Eksozomlar tetraspanninler, proteinler, Annexin ve Rab proteinleri gibi çok çeşitli zar proteinlerine sahiptirler ve bu içeriklere sahip olmaları ile enfeksiyon, sinir sistemi, kanser ve nörodejeneratif hastalıkların tedavi ve teşhisinde kullanılmaya adaydır. Hemen hemen bütün vücut sıvılarından salınan eksozomların hem homojen hem de çok sayıda izole edilebilmesi teşhis ve tedavi için önemlidir. Bu nedenle eksozomların saflaştırılması ve tanıya yönelik spesifik eksozom izolasyonu tedavi amaçlı üretimi açısından önemli bir basamaktır. Bu çalışmada wharton jel kaynaklı ticari mezenkimal kök hücre kültür besiyerinden insert ignore into journalissuearticles values(medyum); farklı izolasyon metotları olan ultrasantrifüj, diferansiyel ultrasantrifüj-filtrasyon ve çökeltme insert ignore into journalissuearticles values(presipitasyon); metodu kullanılarak en çok sayıda ve en saf eksozom izolasyonu yapılması amaçlanmıştır. Eksozomların karakterizasyonu için; görüntülenmesi, saflığı ve boyut analizi her üç metot için belirlenmiştir. Sonuç olarak ultrasantrifüj metodunda, hem diferansiyel ultrasantrifüjfiltrasyon, hem de presipitasyon metoduna göre çok daha fazla sayıda çok daha küçük boyutta eksozom izolasyonu olduğu görülmüştür. Diferansiyel ultrasantrifüj-filtrasyon metodu sonucunda ise eksozom sayısının çok daha az olduğu ancak ultrasantrifüj yöntemi ile elde edilen eksozomlarla aynı saflıkta olduğu görülmüştür. Eksozomların hemen hemen her hastalığın tedavisinde etkin rol almalarından dolayı hastalıkların teşhisinde kullanım kolaylığı sağlamakla birlikte iyi biyo-dağılım, biyouyumluluk ve düşük immünojeniteye sahip olmaları da tedavi aşamasında avantaj sağlayacaktır.
Keywords : Wharton Jel, Eksozom, İzolasyon Metotları

ORIGINAL ARTICLE URL