Papatyadan (Matricaria chamomilla L.) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Çeşitli Taşıyıcılara İmmobilize Edilmesi

Authors : Bahar BİLGİN SÖKMEN, Burçak SARI, Tuğba AZAP

Pages : 131-143

Doi:10.31466/kfbd.396563

View : 19 | Download : 13

Publication Date : 2018-06-18

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen papatyadan ( Matricaria chamomilla L . ) lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın % 70’lik (NH 4 ) 2 SO 4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 26 kat saflaştırıldı. Saflaştırma işlemlerinde protein miktarı Lowry ve E 280 /E 260 Warburg yöntemlerine göre, lipaz esteraz aktivitesi ise Erlanson yöntemine göre tayin edildi. SDS-PAGE elektroforezi ile elde edilen saflaştırılmış enzimin molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Optimum pH ve sıcaklık değerleri belirlendi. Papatyadan saflaştırılan lipazın optimum pH’sının 9, optimum sıcaklığının 50 °C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-nitrofenil palmitatta olduğu ve bu substrata karşı K m ve V max değerlerinin sırasıyla 0,2899 mM ve 144,93 Ünite olduğu saptandı.Ayrıca , papatyadan saflaştırılan lipaz enzimi çeşitli taşıyıcılar   üzerine adsorpsiyon, kovalent ve iyonik bağlama yöntemleri ile immobilize edildi. İmmobilize edilmiş papatya lipazının optimum pH, optimum sıcaklık gibi kinetik özellikleri de incelendi.
Keywords : Papatya Matricaria chamomilla L, Lipaz, Saflaştırma, İmmobilizasyon