Usage of Peptide Antigens for Antibody-Based BoNT Detection System

Amaç: Bu çalışmada, doğal yapılı BoNT A toksininin kendisi yerine biyoinformatik araçlar kullanılarak tasarlanan peptitleri kullanarak BoNT'ye özgü bir bağışıklık tepkisi ortaya çıkarmayı ve bu anti-peptit antikorlarının bir toksin tespit sisteminde kullanımını göstermeyi amaçladık. Yöntem: BoNT A'nın LC, HN ve HC bölgelerine özgü sentetik epitopik bölgeler, IEDB'den B hücresi "Epitop Tahmin Araçları" kullanılarak antijen olarak seçildi ve bir yazılımla (Discovery Studio 4.0) BoNT A yüzeyinde olduğu gösterildi. Seçilen peptidler, fare bağışıklamalarında kullanıldı ve geliştirilen anti-peptid antikorları ile doğal yapılı BoNT A arasındaki ilişki incelendi. Bulgular: Farelerde üç farklı peptide (P1, P2 ve P3) karşı geliştirilen anti-peptid antikorları ile mililitrede pikogram seviyelerinde doğal yapılı BoNT A'nın saptanması gerçekleştirildi. Sonuç: Bu çalışma, sentetik peptitlerin, toksinlere karşı yüksek afiniteli antikorları geliştirmek için en az doğal toksin veya toksoidin kendisi kadar etkili olduğunu göstermektedir. Ayrıca botulizmin hızlı teşhisine duyulan ihtiyaç ve halihazırda kullanılan test sistemlerinde çok sayıda deney hayvanının kurban edildiği göz önüne alındığında, bu sonuçlar hem hayvan sayısını hem de toksin kullanım miktarını azaltmak için sentetik peptit immünojenlerinin kullanılmasının gerekliliğini ortaya koymaktadır.