Kapsaisinin H2452 Mezotelyoma Hücre Hattından Seçilen Klon larda Sitotoksisitesinin ve Kaspaz-3 Üzerine Etkilerinin Belirlenmesi

Authors : Gizem CEYLAN, Sabahattin CÖMERTPAY

Pages : 1125-1134

Doi:10.18016/ksutarimdoga.vi.673591

View : 16 | Download : 13

Publication Date : 2020-10-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Mezotelyoma; kalp, akciğer ve karın gibi iç organların yüzeyini kaplayan mezotelyum dokusundan gelişen bir kanser türüdür ve tümörlerinin poliKlon al kökene sahip olduğu düşünülmektedir. Kapsaisinin kanser hücreleri üzerindeki apoptotik etkileri bilinmektedir. Bu çalışmada; H2452 mezoteliyomahücre hattından seçilmiş dört (I, II, III ve IV numaralı) Klon üzerinde kapsaisinin sitotoksisitesi ve kaspaz-3 ifadesine ve aktivasyonuna etkileri tespit edilmeye çalışılmıştır. Bu amaçla; öncelikle, Klon ların IC50 değerleri MTS [3-(4,5)-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sülfofenil)-2H-tetrazolyum] tuzunun formazana indirgenmesi metoduyla belirlenmiş ve kapsaisin sitotoksisitesinin bazı Klon lar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark gösterdiği (p<0.01) ortaya konulmuştur. Daha sonra, seçilen Klon lara ortalama IC50 derişiminde (251.6 µM) kapsaisin uygulanmış ve hücre büyüme eğrileri çizilmiştir. Buna göre; 72 saat sonunda, Klon I’in diğer Klon lardan daha yüksek sayıda (p<0.001) canlı hücre içerdiği gözlenmiştir. Bunu takiben gerçekleştirilen qRT-PCR ve Western Blotlama ile; kapsaisin uygulanmış (KAP), etanol uygulanmış (EtOH) ve herhangi bir uygulama görmemiş, kontrol grubu hücrelerinde kaspaz-3 molekülünün sırasıyla mRNA ve protein seviyesindeki değişimler tespit edilmiştir. Sonuç olarak; kapsaisin sitotoksistesinin seçilen Klon ile anlamlı bir değişiklik gösterdiği tespit edilmiş, ve kaspaz-3 proteinin inaktif ve aktif biçimlerinin miktarı ile bağıl kaspaz-3 mRNA seviyesi her bir Klon için diğerlerinden farklı sonuçlar ortaya koymuştur. Tüm bulgular birlikte değerlendirildiğinde, mezotelyoma tümörlerini oluşturan hücre popülasyonlarının poliKlon al bir kökene sahip olabileceği fikri destekleniyor görünmektedir.
Keywords : Mezoteliyoma, Kapsaisin, KAP, Tümör heterojenitesi, Apoptoz