Akım sitometrik ölçüm öncesi pre-analitik yöntem optimizasyonu ve postmenapozal süreçte immünfenotipleme örneği

Authors : Mustafa Erinç SİTAR, Yaprak DÖNMEZ ÇAKIL

Pages : 74-78

Doi:10.35514/mtd.2021.34

View : 16 | Download : 14

Publication Date : 2020-12-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Giriş: Akım sitometri tıpta geniş bir kullanım alanına sahiptir. Standartlaştırılmış ve tekrarlanabilir veriler üretilmesi amacı ile standart işlem prosedürleri kullanılmaktadır. Sıçan, immünolojik araştırmalar için yaygın olarak kullanılan bir deney hayvanı modelidir, ancak sıçan türlerindeki yayınlar sınırlı sayıdadır. Amaç: Postmenopozal dönemde olan 19 aylık bir Wistar sıçandan aynı anda alınan periferik kan örneklerin iki farklı pre-analitik yöntem ile akım sitometrik ölçümlere hazırlanması ve lenfosit yüzde oranlarının değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Materyal ve Metodlar: Periferik kan örneklerinden lizis veya yoğunluk gradyan santrifüj yöntemleriyle eritrositler uzaklaştırılmıştır. Uygun miktarda antikorlar ile T, B, doğal öldürücü (NK), T helper ve T sitotoksik hücreleri tanımlanmış, BD Accuri C6+ akım sitometride analiz edilmiş ve yüzde oranları belirlenmiştir. Bulgular: Eritrositlerin lizis tamponu ve yoğunluk gradyanı santrifüjü ile uzaklaştırıldığı iki yöntem ile de lenfosit ve T hücre alt gruplarının yüzde oranları benzer olarak bulunmuştur. Her iki yöntem ile üretilen sonuçlar sağlıklı genç sıçan ile karşılaştırıldığında B hücrelerinde azalma ve NK hücrelerde artış olduğu gözlenmiştir. Sonuç: Çalışmamızda kullanılan iki pre-analitik yöntemin de sıçan tam kanının immünfenotiplemesi için uygun olduğu düşünülmektedir.
Keywords : İmmünfenotipleme, akım sitometri, sıçan