Kolon Kanseri Hücre Modelinde TGF-β ve Hipoksinin ADAMTS-5 Gen İfadesi Üzerindeki Etkisinin Belirlenmesi

Authors : Fatma Poyrazlı, Hatice Erdoğan, Sümeyye Aydoğan Türkoğlu
Pages : 215-227
Doi:10.54370/ordubtd.1661175
View : 59 | Download : 148
Publication Date : 2025-12-27
Article Type : Research Paper
Abstract :Kolorektal kanser, günümüzde kanser kaynaklı ölümlerin yaklaşık %10’undan sorumludur. Kolon epitelinin kötü huylu tümöre dönüşümü sinyalleme kaskadlarının düzensizliğinden kaynaklanır. Bu kaskadlardan biri olan TGF-β (Dönüştürücü büyüme faktörü beta) sinyal iletim yolu; erken neoplaztik olaylarda tümör baskılayıcı olarak görev yaparken hastalığın sonraki evrelerinde epitelden mezenkimale geçişi (EMT) ve metastazı desteklemek için önemli ölçüde değişebilir. Farklı kanser türlerinde potansiyel bir rolü olan ADAMTS-5, agrekan ve versikan gibi hücre dışı matriks bileşenlerini yıkıma uğratan ve embriyonik gelişmede rol oynayan hücre dışı bir metalloproteinazdır. ADAMTS-5’ in aşırı ifadesinin insan glioblastomlarının gelişimini desteklediği ve ADAMTS-5’ in aşağı regülasyonunun veya hipermetilasyonunun, insan kolorektal kanseri, mide kanseri ve melanom dahil olmak üzere birçok kanser türünü inhibe ettiği gösterilmiştir. Çalışmamızda kolon kanseri hücre modeli olan HT-29 hücrelerinde hipoksi ve TGF-β koşullarında ADAMTS-5 geninin protein ve mRNA düzeyindeki etkisi belirlenmiştir. Hipoksik koşullarının oluşturulması için CoCl2 ile indüklenmiş kimyasal hipoksi modeli kullanılmıştır. Çalışmamızda hücrelere uygulanan TGF-β ve CoCl2’ün sitotoksik etkisi MTT yöntemi ile belirlenmiştir. Hücrelere ayrı ayrı ve birlikte uygulanan TGF-β sitokininin ve CoCl2’ün ADAMTS-5 mRNA düzeyindeki ifadesi gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu ile protein seviyesine etkisi Western blot ile belirlenmiştir. ADAMTS-5’in çalışmamız sonuçlarına göre hipoksik regülasyon ile arttığı gösterilmiştir. TGF-β sitokininin ise ADAMTS-5 ifadesini önemli seviyede azalttığı belirlenmiştir.
Keywords : ADAMTS-5, kolon kanseri, hipoksi, TGF-β, metalloproteinaz

ORIGINAL ARTICLE URL