KOLORİMETRİK LOOP-MEDIATED İZOTERMAL AMPLİFİKASYON METODU İLE LISTERIA MONOCYTOGENES’İN TAVUK ETLERİNDE HIZLI TESPİTİ

Bu çalışmanın amacı tavuk etlerinden insert ignore into journalissuearticles values(n:50; bütün kanat, göğüs, baget; toplamda N: 150); Listeria monocytogenes ’in tespitinde kolorimetrik loop-mediated izotermal amplifikasyon’un insert ignore into journalissuearticles values(LAMP); performansını değerlendirmektir. Bu amaçla, tavuk etleri 100-104 CFU/25 g insert ignore into journalissuearticles values(veya bütün tavuk eti); seviyede L. monocytogenes ve rekabetçi mikrobiyota olarak kullanılan 5 diğer bakteri insert ignore into journalissuearticles values( Salmonella Typhimurium, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Staphylococcus aureus, Citrobacter freundii ); ile inoküle edildi. Ön zenginleştirme sonrası örnekler geleneksel kültürel, gerçek zamanlı PZR ve LAMP kullanılarak analiz edildi. Virulans hlyA gen’in primer setleri insert ignore into journalissuearticles values( L. monocytogenes -özgü); hidroksinaftol mavisi insert ignore into journalissuearticles values(HNB); ile görselleştirilmiş LAMP için kullanıldı. Bu hedef gen 65°C 45 dakikada spesifik primerler kullanılarak çoğaltıldı. Üç metot ile gerçekleştirilen analizlerin sonucunda doğal olarak kontamine olmuş 150 örneğin 9’unda insert ignore into journalissuearticles values(%6); L. monocytogenes varlığı tespit edildi. LAMP, qPCR ve klasik metot doğal ve yapay olarak kontamine olmuş örneklerden L. monocytgones için aynı tespit performansını gösterdi. Bu sonuçlar HNB-LAMP yönteminin, PCR`a alternatif olarak, izotermal koşullar altında L. monocytogenes `e duyarlı, spesifik, basit, hızlı bir tespit tekniği olarak kullanılabileceğini ve L. monocytogenes `in tavuk etlerinden saptanma potansiyeline sahip olduğunu gösterdi.