Characterization of Brain and Liver Aromatase of Gilthead Seabream (Sparus aurata L., 1758) using Dibenzylfluorescein

Authors : Demet HANÇER AYDEMİR, Alaattin ŞEN

Pages : 5-14

View : 30 | Download : 10

Publication Date : 2014-07-12

Article Type : Research Paper

Abstract :Aromataz, androjenlerin ösrojenlere dönüşümünü katalizlemektedir. Doğal aromatazın katalitik aktivitesi ve enzim kinetikleri hakkında bilgi balıklarda çok azdır ve bu tür içi ve türler arasında farklı organlardan elde edilen aromataz aktivitesinin insert ignore into journalissuearticles values(AA); karşılaştırılmasını engellemektedir. Bu çalışmada, floresans aromataz metodu, florometrik bir substrat olan dibenzilfloresein insert ignore into journalissuearticles values(DBF); kullanılarak çipura insert ignore into journalissuearticles values(Sparus aurata L., 1758); beyin ve karaciğer mikrozomlarında AA’ni ölçmek için karakterize edilmiştir. Beyin ve karaciğer AA 30 dak reaksiyon zamanı boyunca sırasıyla 20 μg ve 40 μg protein miktarına kadar doğrusallık göstermiştir. Beyin ve karaciğerde enzimin optimum pH’sı sırasıyla 6,50 ve 8,25 olarak ve optimum sıcaklığı her iki doku için 30 ˚C olarak bulunmuştur. Beyin ve karaciğer AA’inin 2 µM DBF konsantrasyonu üzerinde doyuma ulaştığı gözlenmiştir. Lineweaver-Burk grafiği kullanılarak yapılan saptamalarda beyin ve karaciğer aromataz enzimi için Vmax ve Km değerleri belirlemişi ve sırasıyla 8,054±0,550 pmol/dak/mg protein, 8,389±0,543 pmol/dak/mg protein ve 0,840±0,161 µM, 0,959±0,152 µM olarak hesaplanmıştır. Testosteronoun Sparus aurata beyin ve karaciğer aromataz enzimini yarışmalı bir şekilde inhibe ettiği gözlenmiştir. Çipurada beyin ve karaciğer aromatazı için ilk defa rapor edilmiş bu metodun parametreleri diğer türlerde de AA’ni ölçmek için faydalı olabilecektir.
Keywords : Aromataz, Çipura, Beyin, Karaciğer, Dibenzilfloresein

ORIGINAL ARTICLE URL