Reseptör İmmünohistokimyasında Mikrodalga Işınımlı “Antijen Retrieval” Yönteminin Kullanımı

Authors : F Zehra MİNBAY, Özhan EYİGÖR, İlkin ÇAVUŞOĞLU, Zeynep KAHVECİ

Pages : 21-26

View : 42 | Download : 10

Publication Date : 2002-06-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Reseptör immünohistokimyasında önemli problemlerden biri olan antijen miktarının azlığı veya maskelenmesi sorununun giderilmesi amacıyla, doku ya da kesitlere; antijen retrieval insert ignore into journalissuearticles values(AR); yöntemleri uygulanmaktadır. Çalışmamızda, pek çok antijen için başarılı sonuçlar verdiği bilinen mikrodalga ışınımlı AR insert ignore into journalissuearticles values(MW–AR); yönteminin kainat reseptör altünitesi GluR5`e özgün antikor insert ignore into journalissuearticles values(anti-GluR5); için gerekli olup olmadığı, gerekli ise hangi AR solüsyonunun uygun olabileceği araştırıldı. Bu amaçla, perfüzyon yoluyla fikse edilen sıçan beyin dokusundan 50 μm kalınlığında vibratom kesitleri alındı. Kesitlere, taze hazırlanmış iki farklı solusyonda insert ignore into journalissuearticles values(50 mM trisodyum sitrat solüsyonu, pH 4.5 ve 6.0 ya da 10 mM EDTA solüsyonu, pH 8.0); MW–AR işlemini izleyen, yüzen kesit immünohistokimyası uygulandı. Işık mikroskobik incelemelerde, 50 mM trisodyum sitrat solüsyonu insert ignore into journalissuearticles values(pH 6.0); ile AR uygulanan kesitlerde özgün immün işaretlemenin olduğu ve bu kesitlerde zemin boyanmasının olmadığı gözlendi. Sonuç olarak, kullanılan antikor için AR`ın gerektiği ve özgün bir immün reaksiyon için AR solüsyonunun pH`nın ve erişilen son sıcaklığının önemli olduğu belirlendi.
Keywords : Mikrodalga ışınımı, Antijen retrieval, İmmünohistokimya

ORIGINAL ARTICLE URL