Effect of palmitate-induced steatosis on paraoxonase-1 and paraoxonase-3 enzymes in human-derived liver (HepG2) cells

Authors : Gülben SAYILAN ÖZGÜN, Eray ÖZGÜN, Kıymet TABAKÇIOĞLU, Selma SÜER GÖKMEN, Sevgi ESKİOCAK

Pages : 118-121

Doi:10.25000/acem.623975

View : 36 | Download : 14

Publication Date : 2019-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: Palmitat, hem sağlıklı bireylerin hem de non-alkolik karaciğer yağlanması hastalarının karaciğerinde en fazla bulunan yağ asitlerinden biridir. HepG2 hücrelerinde palmitat ile oluşturulan yağlanma, karaciğerdeki yağ birikiminin akut zararlı etkilerinin araştırılmasında kullanılan in vitro non-alkolik yağlı karaciğer hastalığı modelidir. Non-alkolik yağlı karaciğer hastalığı ateroskleroz ile yakından ilişkilidir. Paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 dolaşımda yüksek dansiteli lipoproteine bağlı anti-aterosklerotik enzimlerdir ve esas olarak karaciğerde sentezlenirler. Palmitat ile oluşturulan yağlanmanın paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 enzimleri üzerine etkisini araştıran bir çalışma bulunmamaktadır. Bu çalışmanın amacı HepG2 hücrelerinde palmitat ile oluşturulan yağlanmanın paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 enzimlerine etkisini araştırmaktır. Yöntemler: Yağlanma oluşturmak için hücreler 0.4, 0.7 ve 1 mM palmitat ile 24 saat inkübe edildi. Hücre canlılığı 3-(4,5-Dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazolium bromür testi ile değerlendirildi. Hücreler oil red O ile boyandı ve trigliserit düzeyleri ölçüldü. Paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 protein düzeyleri western blot ile, mRNA’ları ise kantitatif PCR ile ve arilesteraz aktivitesi spektrofotometrik olarak ölçüldü. Bulgular: Tüm palmitat konsantrasyonları paraoksonaz-1 mRNA düzeylerinde anlamlı bir artışa yol açtı. Palmitat konsantrasyonları paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 protein düzeylerinde, paraoksonaz-3 mRNA düzeylerinde ve arilesteraz aktivitesinde anlamlı bir değişime yol açmadı. Sonuç: Çalışmamız, HepG2 hücrelerinde palmitat ile oluşturulan yağlanmanın paraoksonaz-1 mRNA düzeyini arttırdığını, paraoksonaz-1 ve paraoksonaz-3 protein düzeylerine, paraoksonaz-3 mRNA düzeylerine ve arilesteraz aktivitesine etkisi olmadığını gösterdi.
Keywords : Palmitat, paraoksonaz 1, paraoksonaz 3, arilesteraz, HepG2, non alkolik yağlı karaciğer hastalığı

ORIGINAL ARTICLE URL