PARTIAL PURIFICATION and CHARACTERIZATION of ASPARTATE AMINOTRANSFERASE from the HEPATOPANCREAS of the MUSSEL Mytilus galloprovincialis Lam.

Authors : A Can, N Akev A ASKHASI

Pages : 37-48

View : 32 | Download : 20

Publication Date : 2015-09-08

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu qaligmada, Turkiye sahillerinde bulunan Mytilus gallopi.ovincialis Lam. midye tiirunun aspartat ve alanin aminotransferazlarl incelendi. Tum doku, hepatopankreas ve manto k~simlannda yapllan aragt~rmada, aspartat aminotransferazln hepatopankreastaki aktivitesinin alanin aminotransferaza gore fazla olmasindan dolayl, midye hepatopankreas~ndan aspartat aminotransferaz kismen saflagtlrildi ve bazl kinetik ozellikleri incelendi. Deneyin yapilacagl gun 1stanbul Bogazi Rumelikava@i klyilarindan toplanan midyelerin hepatopankreas k~s~rnlarl qlkanlarak, %0.9 NaCl ile, homojenize edildi. Aspartat aminotransferaz aktivitesi gosteren homojenizatin %35-%65 amonyum sulfat kesiti hidroksilapatit kolona uygulandi. pH\`s1 6.8 olan ve artan molaritede fosfat tamponu ile yapllan basamaklt elusyon sonucunda, aspartat aminotransferaz 100 mM fosfat tarnponu ile eliie edildi. Bu iglem sonunda, midye hepatopankreaslndan 83 kez safla~tlnlan aspartat aminotransferazln poliakrilamid jel elektroforezinde iki aktivite bandl gostermesi nedeniyle iki izoenzim iqerdiii sonucuna vanldl. Aspartat aminotransferaz iizerine temperaturun etkisi incelendiginde, enzimin 25 \`C ve 40 \`C\`lerde maksimum aktivite gosterdigi ve aktivitenin 60 \`C\`de tamamen kayboldugu goriildu. Enzimin optimum pH\`slnin pH 7.6\`da oldugu; aspartat ve 2- oksoglutarata kargi Km degerlerinin slraslyla, 1.7 mM ve 6.6~10-~ mM, aynl substratlara kary Vmax degerlerinin ise 0.162 U/ml ve 0.149 U/ml oldugu bulundu. 
Keywords : Mussel, Mytil s galloproviizcialis Lam, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, transaminase

ORIGINAL ARTICLE URL