Kestane Tohumundan (Castanea sativa) Lipaz Enziminin Saflaştırılması ve Kinetik Özelliklerinin İncelenmesi

Authors : Bahar BİLGİN SÖKMEN, Rıdvan İLGÜN

Pages : 101-106

Doi:10.35229/jaes.416800

View : 40 | Download : 12

Publication Date : 2018-12-18

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, ülkemizde Giresun İli ve çevresinde bol miktarda yetişen kestane insert ignore into journalissuearticles values(Castanea Sativa); tohumlarından lipaz enzimi ilk defa saflaştırıldı ve kinetik özellikleri incelendi. Petrol eteri ile yağı uzaklaştırılmış kestane tohumları 0,06 M sodyum fosfat tamponu insert ignore into journalissuearticles values(pH=7,0); ile homojenize edildi. Lipaz esteraz aktivitesi gösteren homojenizatın % 90’lık insert ignore into journalissuearticles values(NH4);2SO4 kesiti elde edildi. Dializden sonra bu kesit sırasıyla hidroksilapatit ve DEAE-selüloz kolonlara uygulanarak lipaz enzimi 186,87 kez saflaştırıldı. SDS-PAGE elektroforezi sonucunda saflaştırılan enzimin molekül ağırlığının 30 kDa olduğu bulundu. Kestane tohumlarından saflaştırılan lipazın optimum pH’sının 9,0; optimum sıcaklığının 30 °C olduğu bulundu. Enzimin çeşitli substratlara karşı ilgisi incelendiğinde, lipazın ilgisinin en çok p-NFM’a olduğu ve Km ve Vmax değerlerinin sırasıyla 1,017 mM ve 163,874 U olduğu saptandı. 
Keywords : Kestane Castanea sativa, tohumu, lipaz, karakterizasyon, saflaştırma

ORIGINAL ARTICLE URL