Pelajik ve Bentik Balıklarının Solungaçlarından Saflaştırılan Karbonikanhidraz Aktivitelerinin İrdelenmesi

Authors : Barbaros DİNÇER, Pelin BİRİNCİ

Pages : 4-10

Doi:10.35229/jaes.636241

View : 45 | Download : 15

Publication Date : 2020-03-31

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, denizel ortamda bentik bölgede yaşayan Mezgit ve pelajik bölgede yaşayan Hamsi balıklarının solungaçlarından karbonik anhidraz insert ignore into journalissuearticles values(CA); saflaştırıldı ve karakterize edildi. Mezgit balığı solungacından elde edilen CA enzimi, Sepharose-4B-L tirozin-sülfanilamid afinite kolonunda 14 kat ve %19,5 verimle saflaştırıldı. Hamsi balığı solungacından elde edilen CA enzimi ise 17 kat ve %9,5 verimle saflaştırıldı. Mezgit ve Hamsi balıklarının özgül aktiviteleri sırasıyla 126,4    EU mg protein -1 ve 1000,0 EU mg protein -1 olarak belirlendi. SDS-PAG Elektroforezi sonucunda her iki balığın solungaçlarından saflaştırılan karbonik anhidrazların altbirim molekül kütlesi yaklaşık 29 kDa olan tek protein bantlarına sahip oldukları belirlendi. Solungaçlarından elde edilen CA’ların p-nitrofenil asetat substratı varlığında esteraz aktiviteleri pH 8,0’da ve 40 o C sıcaklıkta en yüksek olduğu belirlendi. Mezgit ve Hamsi balıklarının solungaçlarından saflaştırılan CA’ nın, p-nitrofenol asetat substratı varlığında Km ve Vmaks değerleri Lineweaver-Burk grafiğiyle hesaplandı ve sırasıyla Km değeri 0,08 mM ve 0,01 mM, Vmaks değeri 1x10 7 m M dak -1 ve 2,5x10 6 m M dak -1 olarak tespit edildi. Mezgit ve Hamsi balıklarının solungaçlarından elde edilen CA’ nın sırasıyla sülfanilamid inhibitörü varlığında 6,0 µM ile 4,0 m M ve asetazolamid inhibitörü varlığında ise 2,0 µM ile 2,0 m M IC 50 değerlerine sahip olduğu tespit edildi.
Keywords : Karbonikanhidraz, mezgit, hamsi, Pelajik, Bentik

ORIGINAL ARTICLE URL