HOMOSİSTEİNİN İNSAN GÖBEK KORDON VEN ENDOTEL HÜCRE KÜLTÜRÜNDE eNOS ve DDAH GEN EKSPRESYONLARI ÜZERİNE ETKİSİ

Authors : Mustafa AKKİPRİK, Duygu ÇEVİK, Ayşe ÖZER, Kaya EMERK

Pages : 144-149

View : 50 | Download : 5

Publication Date : 2015-06-25

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç: Artmış plazma homosistein seviyeleri, miyokard enfarktüsü, felç ve periferik vasküler hastalıklarda bağımsız bir risk faktördür. Bu çalışmada, homosisteinin nitrik oksit insert ignore into journalissuearticles values(NO); sentezini, biyoyararlanımını ve yıkımını nasıl etkilediğini ortaya koymak amacı ile endotel hücre kültüründe endotelyal nitrik oksit sentaz insert ignore into journalissuearticles values(eNOS); ve dimetilarjinin dimetilaminohidrolaz insert ignore into journalissuearticles values(DDAH); gen ekspresyonları ile NO düzeyleri araştırılmıştır. Yöntem: Çalışmada insan göbek kordon ven endotel hücre kültürü insert ignore into journalissuearticles values(HUVEC); yapılmış ve kültür hücreleri 10, 50, 100, 500 ve 1000 µM homosistein konsantrasyonları ile 24 saat inkübe edilmiştir. Daha sonra bu hücrelerden insert ignore into journalissuearticles values(~1x106 hücre); total RNA izolasyonu yapılarak ters transkriptaz insert ignore into journalissuearticles values(RT); reaksiyonu ile komplementer DNA insert ignore into journalissuearticles values(cDNA); eldesi sağlanmıştır. Elde edilen cDNA örnekleri eNOS ve DDAH transkriptlerine özgü primerler kullanılarak polimeraz zincir reaksiyonu insert ignore into journalissuearticles values(PZR); yöntemi ile çoğaltılmıştır. PZR ürünlerinin agaroz jel elektroforezi sonrasında dijital jel görüntüleme sistemi ile dansitometrik olarak ölçümleri yapılmıştır. Ayrıca hücre kültürü medyumlarından elektrokemilüminesans yöntemi ile NO analizleri yapılmıştır. Bulgular: Elde edilen veriler ışığında, homosisteinin endotel hücre kültüründe eNOS ve DDAH gen ekspresyonları üzerine istatistiksel anlamlılık yaratacak herhangi bir etkisinin olmadığı gösterilmiştir. Buna karşın homosisteinin NO düzeyine hafif bir baskılayıcı etkisi olduğu görülmüştür. Sonuç: Sonuç olarak, homosisteinin NO üzerine etkisinin eNOS ve DDAH gen ekspresyonları düzeyinde olmadığı bu nedenle özellikle sübstrat düzeyinde denetim mekanizmaları üzerine yoğunlaşılması gerektiği düşünülmektedir.
Keywords : Homosistein, eNOS, DDAH, Nitrik oksit NO,

ORIGINAL ARTICLE URL