ALS Sinek Modelinde Nörodejenerasyon Mekanizmasının Proteomik ve Genetik Analizi

Authors : Hilal KALKAN, Fabian FEİGUİN, Raffaella KLİMA

Pages : 49-59

View : 18 | Download : 8

Publication Date : 2016-12-01

Article Type : Research Paper

Abstract :Amaç : TDP-43; RNA ba ğ lanma motifleri i ç eren ve pre-mRNA ekleme, transkripsiyon, mRNA stabilitesi ve mRNA transferinde yer ald ığı rapor edilen olduk ç a korunmu ş ve her yerde eksprese edilen n ü kleer proteindir. Son zamanlarda TDP-43 yap ı lan ç al ış malar ile Amyotrofik Lateral Skleroz (ALS) hastalar ı n ı n etkilenmi ş beyin b ö lgelerinde g ö zlenen h ü cre i ç i inkl ü zyonlar ı n ana protein bile ş eni olarak tan ı mland ı . Bu ç al ış mada Drosophila melanogaster ’ de TDP-43 ’ ü n analo ğ unun (TBPH ’ in) ALS modelindeki sinekler ü zerinde proteomik ve genetik mekanizmalar ı i ç erisindeki rol ü n ü n ara ş t ı r ı lmas ı ama ç lanm ış t ı r. Materyal-Metod : WIII8,UAS GFP, GMR,GMR TBPH genotiplerinde bakire di ş i sinekler ve erkekler uygun besiyeri ortam ı nda ç iftle ş tirilerek farkl ı genotip ve fenotiplerde ALS i ç in etki g ö sterebilen transgenik model sinekler ü retildi. Transgenik sineklere TBPH entegre edildi. PCR , Jel Elektroforezi ve 2D k ü tle spektrofotometri y ö ntemleri kullan ı larak TBPH mutantlar ı n ı n analizi yap ı ld ı . Bulgular : TDP-43 ’ ü n analo ğ u olan TBPH ’ i eksprese eden farkl ı transgenik sinekler kullan ı larak , TBPH ’ in ekspresyonunun kontrol gruplar ı na k ı yasla n ö rodejenerasyona neden olup olmad ığı kontrol edildi. TPBH ’ nin ekspresyonunun sineklerin g ö zlerinde siyah lekelerin (nekrozun) geli ş mesine neden oldu ğ u ve g ö zlerde n ö rodejenerasyon olu ş turdu ğ u g ö r ü ld ü . Dahas ı , mutasyon ge ç irmi ş sinekler ü zerinde 2D jel analizi ile protein agregasyonunda TBPH ’ in rol ü n ü d üşü nd ü ren sinek t ü rlerine k ı yasla di ğ er sineklerin g ö zlerinde azalm ış ya ğ v ü cut proteinleri 1 (Fbp1) seviyeleri g ö sterildi. Sonuçlar : Sonu ç olarak TBPH ’ in Fbp1 ’ n ı n ü retimini art ı rarak n ö rodejeneratif s ü rece kar ış t ığı g ö r ü ld ü .
Keywords : ALS, Drosophila, TDP 43, Fbp1

ORIGINAL ARTICLE URL