In vitro AND in silico EVALUATION OF THYMOQUINONE AS POTENTIAL ANTICANCER AGENT IN HUMAN ACUTE MYELOID LEUKEMIA HL-60 CELLS

Authors : Neslihan TEKİN KARACAER

Pages : 53-63

Doi:10.23902/trkjnat.999403

View : 38 | Download : 12

Publication Date : 2022-04-15

Article Type : Research Paper

Abstract :Bu çalışmada, insan akut miyeloid lösemisinde timokinonun sitotoksik, apoptotik ve otofajik etkilerinin araştırılması amaçlandı. Timokinonun sitotoksik etkileri 3-insert ignore into journalissuearticles values(4,5-dimetiltiyazol2-yl);-2,5-difeniltetrazolyum-bromür insert ignore into journalissuearticles values(MTT); testi ile belirlendi. B hücre lenfoma 2 ile ilişkili X proteini insert ignore into journalissuearticles values(Bax);, B hücre lenfoma 2 insert ignore into journalissuearticles values(Bcl-2);, kaspaz 3, rapamisinin memeli hedefi insert ignore into journalissuearticles values(mTOR);, fosfatidilinositol-3-kinaz insert ignore into journalissuearticles values(PI3K); ve protein kinaz B insert ignore into journalissuearticles values(AKT); gen ekspresyon analizleri kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu insert ignore into journalissuearticles values(qRT-PCR); ile yapıldı. Bax, Bcl-2, kaspaz 3, mTOR, AKT ve PI3K proteinlerinin aktif bölgesindeki timokinonun potansiyel bağlanmasını araştırmak için AutoDock Tools 4.2 yazılımı kullanıldı. Timokinon, HL-60 hücrelerinde insert ignore into journalissuearticles values(İnsan lösemi hücre hattı); 16.35 µM değerinde sitotoksik etkiye neden olmuştur. Uygulanan tüm dozlarda kontrole göre Bcl-2 ekspresyonu azalmıştır. 10 µM, 15 µM ve 25 µM timokinon ile tedavi edilen hücrelerde kontrole göre kaspaz 3 ekspresyon seviyesinde bir azalma tespit edildi. Timokinon, tüm dozlarda kontrole kıyasla mTOR ve PI3K ifadelerinde önemli bir azalmaya neden olurken, AKT 15 µM`lik bir dozda azaldı. Yerleştirme sonuçları, timokinonun apoptotik ve otofajik proteinlerin aktif bölge amino asitleri ile hidrofobik etkileşimler ve hidrojen bağı yoluyla etkileşime girdiğini belirtti. Bulgularımız, timokinonun HL-60 hücrelerinde PI3K/AKT/mTOR yolunu önleyerek otofajiyi uyarabildiğini ve akut miyeloid lösemi tedavisi için yeni bir hedef olabileceğini düşündürmektedir.
Keywords : AML, Apoptosis, Autophagy, Molecular docking, PI3K AKT mTOR, Thymoquinone

ORIGINAL ARTICLE URL