Organik Atıklardan Elde Edilen Besiyerinde Üreyen Aspergillus niger’den Proteaz Enzimi Üretimi ve Karakterizasyonu

Authors : Betül Tekyıldız, Özge Aslan, Arzu Çağrı Mehmetoğlu

Pages : 37-46

Doi:10.24323/akademik-gida.1697198

View : 107 | Download : 148

Publication Date : 2025-05-11

Article Type : Research Paper

Abstract :Ticari enzim pazarında önemli bir yeri olan proteolitik enzim grubundan proteazlar, geniş ve farklı biyoteknolojik uygulamaları nedeniyle yüksek talep gören bir enzim grubudur. Bu enzimlerin küfler kullanılarak fermantasyon yoluyla üretilmesi tercih edilen bir yöntemdir. Çünkü, enzimlerin konsantre halde ekstraselüler olarak üretilmesiyle geri kazanımı daha kolay ve maliyet açısından daha elverişli bir üretim yöntemi olmaktadır. Bu nedenle çalışmada, organik çöpler substrat olarak kullanılarak Aspergillus niger\\\'den proteazların üretimine alternatif oluşturmak ve enzimin saflaştırılmasına bir temel oluşturmak amaçlanmıştır. Araştırmada, A. niger inoküle edilen %50 protein oranında organik atıklardan hazırlanan besiyerinin, 30°C’de 24 saat inkübasyon süresinde, pH 5.5’te enzim üretimi için optimum besiyeri olduğu tespit edilmiştir. A. niger’den üretilen proteaz enzimi geniş bir uygulama alanına sahip, çok yönlü bir biyo-ayırma aracı haline gelen, yüksek geri kazanım ve saflık seviyelerine sahip bir dizi enzim ve proteini saflaştırmak için kullanılan üçlü faz ayırma (TPP) sistemi ile kısmen saflaştırılmış ve biyokimyasal karakterizasyonları incelenmiştir. TPP sistemi ile proteaz enzimi 1.0:1.5 (ham enzim çözeltisi: t-bütanol oranı) ve %80 doygun amonyum sülfat konsantrasyonu ile %235.7 verimle 13.15 kat saflaştırılmıştır. Enzimin molekül ağırlığı MALDI-TOF yöntemiyle 15.56 kDa olarak belirlenmiştir. A. niger’den saflaştırılan proteaz enziminin optimum ve stabil pH’ları sırasıyla 10.0 ve 9.0 iken optimum ve stabil sıcaklığı ise 60°C olmuştur. Okside edici ajanlar, yüzey aktif maddeleri, inhibitör ve substrat varlığı proteaz enziminin aktivite değerlerinde azalmaya neden olmuştur.
Keywords : Proteaz, Aspergillus niger, Üçlü faz ayırma sistemi (TPP), Taguchi

ORIGINAL ARTICLE URL